Mae (Cytometry llif, FCM) yn ddadansoddwr celloedd sy'n mesur dwyster fflwroleuedd marcwyr celloedd wedi'u lliwio. Mae'n dechnoleg uwch-dechnoleg a ddatblygwyd yn seiliedig ar ddadansoddi a didoli celloedd sengl. Gall fesur a dosbarthu maint, strwythur mewnol, DNA, RNA, proteinau, antigenau a phriodweddau ffisegol neu gemegol eraill celloedd yn gyflym, a gall fod yn seiliedig ar gasglu'r dosbarthiadau hyn.
Mae cytometr llif yn cynnwys y pum rhan ganlynol yn bennaf:
1 Siambr llif a system hylifedd
2 Ffynhonnell golau laser a system siapio trawst
3 System optegol
4 System electroneg, storio, arddangos a dadansoddi
5 System didoli celloedd
Yn eu plith, cyffroi laser yn y ffynhonnell golau laser a'r system ffurfio trawst yw'r prif fesuriad o signalau fflwroleuol mewn cytometry llif. Mae dwyster y golau cyffroi a'r amser amlygiad yn gysylltiedig â dwyster y signal fflwroleuol. Mae laser yn ffynhonnell golau gydlynol a all ddarparu goleuo tonfedd sengl, dwyster uchel, a sefydlogrwydd uchel. Dyma'r ffynhonnell golau cyffroi delfrydol i fodloni'r gofynion hyn.
Mae dau lens silindrog rhwng y ffynhonnell laser a'r siambr llif. Mae'r lensys hyn yn ffocysu trawst laser gyda thrawsdoriad crwn sy'n cael ei allyrru o'r ffynhonnell laser i drawst eliptig gyda thrawsdoriad llai (22 μm × 66 μm). Mae ynni'r laser o fewn y trawst eliptig hwn wedi'i ddosbarthu yn ôl dosbarthiad arferol, gan sicrhau dwyster goleuo cyson ar gyfer celloedd sy'n mynd trwy'r ardal canfod laser. Ar y llaw arall, mae'r system optegol yn cynnwys setiau lluosog o lensys, tyllau pin, a hidlwyr, y gellir eu rhannu'n fras yn ddau grŵp: i fyny ac i lawr yr afon o'r siambr llif.
Mae'r system optegol o flaen y siambr llif yn cynnwys lens a thwll pin. Prif swyddogaeth y lens a'r twll pin (fel arfer dwy lens a thwll pin) yw ffocysu'r trawst laser gyda thrawsdoriad crwn a allyrrir gan y ffynhonnell laser yn drawst eliptig gyda thrawsdoriad llai. Mae hyn yn dosbarthu ynni'r laser yn ôl dosbarthiad arferol, gan sicrhau dwyster goleuo cyson ar gyfer celloedd ar draws yr ardal canfod laser a lleihau ymyrraeth o olau crwydr.
Mae tri phrif fath o hidlwyr:
1: Hidlydd pas hir (LPF) - dim ond golau â thonfeddi sy'n uwch na gwerth penodol y mae'n ei ganiatáu i basio drwodd.
2: Hidlydd pasio byr (SPF) - dim ond golau â thonfeddi islaw gwerth penodol y mae'n ei ganiatáu i basio drwodd.
3: Hidlydd bandpas (BPF) - dim ond golau mewn ystod tonfedd benodol y mae'n ei ganiatáu i basio drwodd.
Gall gwahanol gyfuniadau o hidlwyr gyfeirio signalau fflwroleuedd ar wahanol donfeddi i diwbiau ffotoluosogydd unigol (PMTs). Er enghraifft, hidlwyr ar gyfer canfod fflwroleuedd gwyrdd (FITC) o flaen PMT yw LPF550 a BPF525. Yr hidlwyr a ddefnyddir i ganfod fflwroleuedd oren-goch (PE) o flaen y PMT yw LPF600 a BPF575. Yr hidlwyr ar gyfer canfod fflwroleuedd coch (CY5) o flaen y PMT yw LPF650 a BPF675.
Defnyddir cytometry llif yn bennaf ar gyfer didoli celloedd. Gyda datblygiad technoleg gyfrifiadurol, datblygiad imiwnoleg a dyfeisio technoleg gwrthgyrff monoclonaidd, mae ei gymwysiadau mewn bioleg, meddygaeth, fferylliaeth a meysydd eraill yn dod yn fwyfwy cyffredin. Mae'r cymwysiadau hyn yn cynnwys dadansoddi dynameg celloedd, apoptosis celloedd, teipio celloedd, diagnosis tiwmorau, dadansoddi effeithiolrwydd cyffuriau, ac ati.
Amser postio: Medi-21-2023
