Mae (cytometreg llif, FCM) yn ddadansoddwr celloedd sy'n mesur dwyster fflwroleuedd marcwyr celloedd lliw. Mae'n dechnoleg uwch-dechnoleg a ddatblygwyd yn seiliedig ar ddadansoddiad a didoli celloedd sengl. Gall fesur a dosbarthu maint, strwythur mewnol, DNA, RNA, proteinau, antigenau a phriodweddau ffisegol neu gemegol eraill celloedd, a gall fod yn seiliedig ar gasgliad y dosbarthiadau hyn.
Mae cytomedr llif yn cynnwys y pum rhan ganlynol yn bennaf:
1 Siambr Llif a System Hylif
2 ffynhonnell golau laser a system siapio trawst
3 System Optegol
4 System Electroneg, Storio, Arddangos a Dadansoddi
System didoli 5 celloedd
Yn eu plith, cyffro laser yn y ffynhonnell golau laser a'r system ffurfio trawst yw prif fesur signalau fflwroleuedd mewn cytometreg llif. Mae dwyster y golau cyffroi a'r amser amlygiad yn gysylltiedig â dwyster y signal fflwroleuedd. Mae Laser yn ffynhonnell golau gydlynol a all ddarparu goleuo un donfedd, dwyster uchel a goleuni uchel ei sefydlogrwydd. Dyma'r ffynhonnell golau cyffroi delfrydol i fodloni'r gofynion hyn.
Mae dwy lens silindrog rhwng y ffynhonnell laser a'r siambr llif. Mae'r lensys hyn yn canolbwyntio trawst laser gyda chroestoriad crwn wedi'i ollwng o'r ffynhonnell laser i mewn i drawst eliptig gyda chroestoriad llai (22 μm × 66 μm). Mae'r egni laser yn y trawst eliptig hwn yn cael ei ddosbarthu yn ôl dosbarthiad arferol, gan sicrhau dwyster goleuo cyson ar gyfer celloedd sy'n pasio trwy'r ardal canfod laser. Ar y llaw arall, mae'r system optegol yn cynnwys setiau lluosog o lensys, tyllau pin, a hidlwyr, y gellir eu rhannu'n fras yn ddau grŵp: i fyny'r afon ac i lawr yr afon o'r siambr llif.
Mae'r system optegol o flaen y siambr llif yn cynnwys lens a thwll pin. Prif swyddogaeth y lens a'r twll pin (dwy lens fel arfer a thwll pin) yw canolbwyntio'r trawst laser gyda chroestoriad crwn a allyrrir gan y ffynhonnell laser i mewn i drawst eliptig gyda chroestoriad llai. Mae hyn yn dosbarthu'r egni laser yn ôl dosbarthiad arferol, gan sicrhau dwyster goleuo cyson ar gyfer celloedd ar draws yr ardal canfod laser a lleihau ymyrraeth o olau crwydr.
Mae yna dri phrif fath o hidlwyr:
1: Hidlydd pasio hir (LPF) - dim ond yn caniatáu golau â thonfeddi uwch na gwerth penodol i fynd drwyddo.
2: Hidlydd pasio byr (SPF) - dim ond yn caniatáu golau â thonfeddi islaw gwerth penodol i basio trwyddo.
3: Hidlydd bandpass (BPF) - dim ond yn caniatáu i olau mewn ystod tonfedd benodol fynd drwyddo.
Gall gwahanol gyfuniadau o hidlwyr gyfeirio signalau fflwroleuedd ar wahanol donfeddi i diwbiau ffotomultiplier unigol (PMTs). Er enghraifft, hidlwyr ar gyfer canfod fflwroleuedd gwyrdd (FITC) o flaen PMT yw LPF550 a BPF525. Yr hidlwyr a ddefnyddir i ganfod fflwroleuedd oren-goch (PE) o flaen y PMT yw LPF600 a BPF575. Yr hidlwyr ar gyfer canfod fflwroleuedd coch (CY5) o flaen y PMT yw LPF650 a BPF675.
Defnyddir cytometreg llif yn bennaf ar gyfer didoli celloedd. Gyda datblygiad technoleg gyfrifiadurol, datblygu imiwnoleg a dyfeisio technoleg gwrthgorff monoclonaidd, mae ei gymwysiadau mewn bioleg, meddygaeth, fferylliaeth a meysydd eraill yn dod yn fwyfwy eang. Mae'r cymwysiadau hyn yn cynnwys dadansoddiad dynameg celloedd, apoptosis celloedd, teipio celloedd, diagnosis tiwmor, dadansoddiad effeithiolrwydd cyffuriau, ac ati.
Amser Post: Medi-21-2023
