Dadansoddwr celloedd yw (cytometreg llif , FCM ) sy'n mesur dwyster fflworoleuedd marcwyr celloedd lliw.Mae'n dechnoleg uwch-dechnoleg a ddatblygwyd yn seiliedig ar ddadansoddi a didoli celloedd sengl.Gall fesur a dosbarthu maint, strwythur mewnol, DNA, RNA, proteinau, antigenau a phriodweddau ffisegol neu gemegol eraill celloedd yn gyflym, a gall fod yn seiliedig ar gasgliad y dosbarthiadau hyn.
Mae cytomedr llif yn bennaf yn cynnwys y pum rhan ganlynol:
1 Siambr llif a system hylifeg
2 Ffynhonnell golau laser a system siapio trawst
3 System optegol
4 System electroneg, storio, arddangos a dadansoddi
5 System didoli celloedd
Yn eu plith, cyffro laser yn y ffynhonnell golau laser a'r system ffurfio trawst yw'r prif fesuriad o signalau fflworoleuedd mewn cytometreg llif.Mae dwyster y golau excitation a'r amser amlygiad yn gysylltiedig â dwyster y signal fflworoleuedd.Mae laser yn ffynhonnell golau cydlynol a all ddarparu goleuo tonfedd sengl, dwyster uchel a sefydlogrwydd uchel.Dyma'r ffynhonnell golau excitation delfrydol i fodloni'r gofynion hyn.
Mae dwy lens silindrog rhwng y ffynhonnell laser a'r siambr llif.Mae'r lensys hyn yn canolbwyntio trawst laser gyda chroestoriad cylchol a allyrrir o'r ffynhonnell laser i mewn i belydr eliptig gyda thrawstoriad llai (22 μm × 66 μm).Mae'r ynni laser o fewn y trawst eliptig hwn yn cael ei ddosbarthu yn ôl dosbarthiad arferol, gan sicrhau dwyster goleuo cyson ar gyfer celloedd sy'n mynd trwy'r ardal canfod laser.Ar y llaw arall, mae'r system optegol yn cynnwys setiau lluosog o lensys, tyllau pin, a hidlwyr, y gellir eu rhannu'n fras yn ddau grŵp: i fyny'r afon ac i lawr yr afon o'r siambr llif.
Mae'r system optegol o flaen y siambr llif yn cynnwys lens a thwll pin.Prif swyddogaeth y lens a'r twll pin (fel arfer dwy lens a thwll pin) yw canolbwyntio'r trawst laser gyda chroestoriad crwn a allyrrir gan y ffynhonnell laser i mewn i belydr eliptig â thrawstoriad llai.Mae hyn yn dosbarthu'r ynni laser yn ôl dosbarthiad arferol, gan sicrhau dwyster goleuo cyson ar gyfer celloedd ar draws yr ardal canfod laser a lleihau ymyrraeth gan olau strae.
Mae tri phrif fath o hidlyddion:
1: Hidlydd pas hir (LPF) - dim ond yn caniatáu golau â thonfeddi uwch na gwerth penodol i basio drwodd.
2: Hidlydd pas-byr (SPF) - dim ond yn caniatáu i olau â thonfeddi islaw gwerth penodol basio drwodd.
3: Hidlydd bandpass (BPF) - dim ond yn caniatáu golau mewn ystod tonfedd penodol i basio drwodd.
Gall gwahanol gyfuniadau o hidlwyr gyfeirio signalau fflworoleuedd ar wahanol donfeddi i diwbiau ffoto-luosi unigol (PMTs).Er enghraifft, hidlwyr ar gyfer canfod fflworoleuedd gwyrdd (FITC) o flaen PMT yw LPF550 a BPF525.Yr hidlwyr a ddefnyddir i ganfod fflworoleuedd oren-goch (PE) o flaen y PMT yw LPF600 a BPF575.Yr hidlwyr ar gyfer canfod fflworoleuedd coch (CY5) o flaen y PMT yw LPF650 a BPF675.
Defnyddir cytometreg llif yn bennaf ar gyfer didoli celloedd.Gyda datblygiad technoleg gyfrifiadurol, datblygiad imiwnoleg a dyfeisio technoleg gwrthgyrff monoclonaidd, mae ei gymwysiadau mewn bioleg, meddygaeth, fferylliaeth a meysydd eraill yn dod yn fwyfwy eang.Mae'r cymwysiadau hyn yn cynnwys dadansoddi dynameg celloedd, apoptosis celloedd, teipio celloedd, diagnosis tiwmor, dadansoddi effeithiolrwydd cyffuriau, ac ati.
Amser post: Medi-21-2023
